BECOME A MEMBER
สมัคร ! สมาชิกชมรมรักสุขภาพ
ฟรี ข่าวสาระความรู้เรื่องสุขภาพ

Top wpe5.jpg (2068 bytes)

Browser คุณไม่ support Java / your browser does not support JAVA
จึงไม่สามารถแสดงผลได้
 QUIKSTRIP ONESTEP PLASMODIUM FALCIPARUM
 
MALARIA TEST
 ชุดตรวจหาการติดเชื้อมาลาเรียชนิด พลาสโมเดียม ฟัลซิฟารั่ม จากเลือดปลายนิ้ว
 อาศัยหลักการอิมมูโนแอสเสย์ มีความจำเพาะต่อเชื้อสูง  ขั้นตอนทดสอบง่าย
                                              cica.jpg (1901 bytes)
 INTRODUCTION   
                                                    
  ULTIMED Quikstrip P.falciparum malaria test เป็นชุดทดสอบคัดกรองแบบขั้นตอนเดียว
 อาศัยหลักการ two site sandwich immunoassay       เพื่อตรวจหา
 P.falciparum specific histidine rich protein-2 (Pf HRP-2) จากตัวอย่างเลือด ทั้งเลือด
 จากปลายนิ้ว / เลือดจาก EDTA / เลือดจาก HEPARIN

  SUMMARY
มาลาเรียจัดเป็นพาราไซต์ที่เป็นปัญหาสำคัญตัวหนึ่งของโลกเขตร้อน สามารถทำ ให้ถึงกับเสียชีวิตได้
 เป็นลำดับต้นๆรองจากวัณโรค ประมาณว่าเกือบ 40% ของประชากรโลกอาศัยอยู่ในแหล่งระบาดของ
 เชื้อมาลาเรีย การติดต่อที่สำคัญมาสู่คน

 มาจากยุงโดยเฉพาะยุงก้นปล่องที่เป็นพาหะมากัดคนในขณะดูดเลือดและปล่อย เชื้อมาลาเรียเข้ามาสู่คน 
 ประกอบกับการขนส่งเดินทางที่สดวกรวดเร็วในปัจจุบัน เป็นตัวการสำคัญที่ช่วยกระจายโรคมาลาเรีย
 นี้ออกไปสู่พื้นที่อื่นที่ไม่ได้เป็นแหล่งระบาดได้อย่างมากในปัจจุบันเชื้อมาลาเรียที่เป็นสาเหตุสำคัญที่ทำ
 ให้เกิดโรคในมนุษย์มี 4 สายพันธุ์คือ
 พลาสโมเดียม ฟัลซิฟารั่ม / พลาสโมเดียม ไวแว็ก / พลาสโมเดียม โอวาเล่ และพลาสโมเดียม มาลาเลอี 
 แต่ตัวที่เป็นปัญหาสำคัญได้แก่
  พลาสโมเดียม ฟัลซิฟารั่ม (P.falciparum) เนื่องจากมีความรุนแรงและสามารถทำให้เสียชีวิตได้
 มากกว่าสายพันธุ์ อื่นๆ
  พลาสโมเดียม ไวแว็ก (P.vivax) เป็นชนิดที่พบได้บ่อยแต่มีความรุนแรงของอาการน้อยกว่าตัวแรก
  พลาสโมเดียม มาลาเลอี (P.malariae) เป็นชนิดที่พบได้ในพื้นที่เฉพาะแถบอัฟริกา อเมริกาใต้ 
 และ แถบนิว กินี
  พลาสโมเดียม โอวาเล่ (P.ovale ) เป็นชนิดที่พบได้ในพื้นที่เฉพาะแถบทรอปิคอลอัฟริกา

เนื่องจากอาการและความรุนแรงของเชื้อมาลาเรียชนิด P.falciparum  การตรวจพบและแยกชนิดได้เร็วมากเท่าไรผู้ป่วย ก็จะมีความปลอดภัย
และลดโอกาสเสียชีวิตได้มากขึ้น  เนื่องจากเชื้อชนิด P.falciparum สามารถทำให้เกิดเชื้อมาลาเรียขึ้นสมองได้ และยังเป็นชนิดที่ดื้อยาและทน
ต่อยาได้มากกว่าชนิดอื่นๆ จึงเป็น

ความจำเป็นที่ต้องรีบแยกชนิดและตรวจหาการติดเชื้อให้ได้เร็วที่สุด เพื่อการดูแลรักษาให้ตรงกับชนิดให้มากที่สุด

พลาสโมเดียม ฟัลซิฟารั่ม ฮีสติดีน ริช โปรตีน-2 (Pf HRP-2)
เป็นโปรตีนชนิดที่ละลายน้ำได้ เป็นโปรตีนที่ขับออกมา
จากเม็ดเลือดแดงที่มีเชื้อมาลาเรียอาศัยอยู่ซึ่งจัดเป็นตัวบ่งชี้ที่สำคัญในการใช้ตรวจหาตัวเชื้อมาลาเรียชนิดฟัลซิฟารั่ม

ชุดทดสอบ ULTIMED แบบขั้นตอนเดียวในการตรวจเชื้อมาลาเรียฟัลซิฟารั่ม เป็นการตรวจหา Pf. HRP-2 ในตัวอย่างเลือด
 ชึ่งมีความแม่นยำและจำเพาะต่อเชื้อมาลาเรียชนิด ฟัลซิฟารั่ม สูง
Pf HRP-2 เป็นสารที่อยู่ในร่างกายได้หลายวันถึงแม้การรักษาสำเร็จอย่างสมบูรณ์แล้ว ดังนั้นการจะใช้ทดสอบเพื่อตามผลการ
รักษาควรจะทำการทดสอบภายหลัง 15 วันหลังจบการรักษาแล้ว จึงจะใช้ช่วยยืนยันการรักษาได้ 

ความไวของชุดทดสอบเมื่อเปรียบเทียบกับจำนวนเชื้อในตัวอย่างเลือดได้ดังนี้

จำนวนเชื้อ 100 ตัว/ไมโครลิตรเลือด = 100% sensitivity
จำนวนเชื้อ 50 ตัว/ไมโครลิตรเลือด = 70% sensitivity
จำนวนเชื้อ 10 ตัว/ไมโครลิตรเลือด = 50% sensitivity


PRINCIPLE
Quikstrip P.falciparum malaria test เป็นชุดทดสอบแบบขั้นตอนเดียว ไม่ต้องอาศัยความชำนาญใน
การตรวจแยกชนิดของเชื้อ มีความจำเพาะสูงในการแยกชนิดเชื้อของ P.falciparum malaria 
อาศัยหลักการของ CICA technique (Color ImmunoChromatographic Assay) โดยการใช้บัปเฟอร์
เป็นตัวพาให้เลือดเคลื่อนตัวผ่านไปบนแผ่นเมมเบรนของแถบตรวจ เมื่อเคลื่อนตัวมาถึงบริเวณน้ำยาที่เคลือบอยู่ 
(anti Pf HRP-2 antisera~colloidal gold conjugate (monoclonal complexes) 
ในกรณีที่ตัวอย่างเลือดมีเชื้อมาลาเรียอยู่ Pf HRP-2   ที่เกิดจากเชื้อ P.falciparum จะเกิดการจับตัวกันเป็นคอมเพล็ก 
และเมื่อเคลื่อนมายังบริเวณทดสอบ ส่วนคอมเพล็กจะถูกจับติดอยู่กับส่วน test band โดย immobilised anti Pf HRP-2 
(monoclonal) antisera ทำให้เกิดเป็นแถบสีม่วงให้เห็น แสดงว่าตัวอย่างมีการติดเชื้อ พลาสโมเดียม ฟัลซิฟารั่ม
สำหรับส่วนของ anti Pf HRP-2 antisera~colloidal gold conjugate (monoclonal) อิสระที่ไม่ได้จับกับ 
Pf HRP-2 ก็จะเคลื่อนตัวผ่านเส้นทดสอบต่อไปและจะไปถูกจับให้ติดอยู่กับส่วน control band ด้วย immobilized 
by anti mouse antibodies ทำให้เกิดเป็นแถบสีม่วงเส้นที่สองขึ้นซึ่งใช้เป็นตัวชี้ว่าน้ำยายังทำงานตามปกติอยู่

REAGENTS AND MATERIAL SUPPLIED

ในชุดทดสอบประกอบด้วย :

1. Individually pouched dipsticks : แถบตรวจในซองฟลอย์พร้อมสารป้อง
    กันความชื้น
2. Clearing buffer : น้ำยาบัปเฟอร์สำหรับทดสอบในขวดหยด
3. Sample application pipettes. หลอดหยดตัวอย่างทดสอบ
4. Package insert คู่มือทำการทดสอบ

STORAGE AND STABILITY

ชุดทดสอบควรเก็บที่อุณหภูมิ 4 - 30 องศาเซลเซียส ในระหว่างรอการใช้งาน จะมี
อายุตรงกับที่กล่องระบุ ไม่ควรแช่แข็ง หลีกเลี่ยงความร้อนและแสงแดดจัด อาจทำ
ให้น้ำยาเสื่อมเร็วกว่ากำหนดได้

 ข้อควรระวัง
- อ่านคู่มือการทดสอบให้เข้าใจก่อนเริ่มทำการทดสอบ
- เป็นการทดสอบภายนอกร่างกายเท่านั้น ( in vitro diagnostic use only )
- ไม่ควรนำชุดที่หมดอายุแล้วมาทำการทดสอบ
- ไม่ควรนำชุดทดสอบและน้ำยาบัปเฟอร์คนละ Lot มาใช้ร่วมกัน
- ระมัดระวังตัวอย่างทดสอบ ตามมาตรฐานความปลอดภัยการติดเชื้อ

การเก็บตัวอย่างทดสอบ
- ตัวอย่างเลือดที่ใหม่ ในสารป้องกันการแข็งตัวของเลือด เช่น EDTA / Heparin / Oxalate
- ตัวอย่างเลือดที่เจาะจากปลายนิ้ว
- เลือดที่ไม่สามารถทดสอบได้ทันที สามารถเก็บแช่เย็นที่ 2-8 องศาได้นาน 3 วัน
- Clotted Blood เลือดที่แข็งตัวแล้ว ไม่เหมาะสมในการนำมาทำการทดสอบ


การทำการทดสอบ
1. นำชุดทดสอบมารอไว้ให้ได้ตามอุณหภูมิห้องก่อนนำมาใช้ทดสอบ
2. ดึงแถบตรวจมาวางรอไว้บนพื้นราบที่เรียบและสะอาด
3. นำตัวอย่างเลือดจำนวน 5 ul. มาหยดลงในพื้นที่ส่วนล่างของลูกศร
4. หยดน้ำยาบัปเฟอร์จำนวน 4 หยดลงในภาชนะที่สะอาด / หลอดทดสอบ
5. จุ่มแถบตรวจที่หยดตัวอย่างเลือดแล้วลงไปในบัปเฟอร์ โดยให้ด้านลูกศรลงไป
    ในบัปเฟอร์ก่อน
6. รออ่านผลการทดสอบที่ 10 นาที ไม่ควรอ่านผลนานเกินกว่า 15 นาที

การแปลผลการตรวจ
NEGATIVE ตรวจไม่พบเชื้อ P.falciparum ในตัวอย่างเลือด จะปรากฏแถบสีม่วงเพียง 1 แถบ
pf1.JPG (1937 bytes)


POSITIVE ตรวจพบเชื้อ P.falciparum ในตัวอย่างเลือด จะปรากฏแถบสีม่วงจำนวน 2 แถบ
pf2.JPG (1939 bytes) 


INVALID
ไม่ปรากฏแถบสีใดๆเลย ให้อ่าน/ตรวจสอบขั้นตอน เริ่มทดสอบใหม่



ข้อจำกัดของการทดสอบ
1. สารโปรตีน Pf HRP-2 ที่ขับออกมาจากเชื้อมาลาเรีย Pf จะอยู่ได้ในเลือดได้นานหลายวัน ถึงแม้จะรักษาได้ผลดีแล้วก็ตาม 
    ดังนั้นการใช้ชุดทดสอบเพื่อติดตามผลการรักษา ควรตรวจภายหลังการรักษาไปแล้ว 2 อาทิตย์ถ้าไม่ปรากฏ 2 แถบ แสดงว่า
   การรักษาได้ผลเรียบร้อย
2. ถึงแม้จะเป็นชุดที่มีความไวและความจำเพาะสูง แต่ก็ควรใช้ประกอบกับอาการอื่นๆร่วมด้วย


 

  Quikstrip P.falciparum malaria test       

Malaria is by far the world,s most important tropical paraitic diseease, and kills more people than
any other communicable disease except tuberculosis Forty per cent of the world,s population still 
live in endermic areas and in addition, cheap mass transportation facilitates importation of cases 
and reintroduction of the disease into non-endemic countries, 

The causative aqents in humans are four species of Plasmodium protozoa - P.falclparum, P vivax, 
P ovale and P.malariae, 
The most important of these is P.falciparum because it can be rapidly tatal, 
P vivax is the most commonly seen species,  P malariae is present in Atrica, South America 
and in one area of New Guinea, P ovale is found many in tropical Africa,
lmportation of malarla is of high impact in non-endemic countries, The UK has one of the highest 
rates of imported malaria in Western world (1)


P talciparum accounts tor the majority of intections and is the most lethal lf promptiy diagnosed and 
adequateiy treated, Malaria is a curable disease.
A number of new techniques have recentiy become available for tha diagnosis of malaria. The long
established method of examining thick and thin blood films is still accepted as the "gold standard"
Staining with acridine orange - another blood smear test - is in use in some laboratories and has
been refined into the quantitaive buffy coat method (QBC: A capillary tube coated with acridine
orange is flled with blood and spun on a honzontai centrituge. Evaluation is then done with paraviewer
and tluorescent microscope.) (7, 8) As these tests are time consuming, labour intensive and require
considerable experienc for detecting low levels of parasitaemia (7), a new test methods can now be
applied for the plasmodlum with the highest prevalenca, the Plasmodium falciparum (1)

Plasmodium falciparum-infected erythrocytes synthesize several histidine-nch proteins (HRPs, Pf HRPs)
The Hrp-l (Pf - HRP-1) is the knob-associated protein thal binds to the erythrocyte skeleton to form the 
electron-dense cup The electron-dense cup produces knobs, which are the specific points of attachment 
between intected eythrocytes and endothelium (9, 10) The Pf - HRP-3 is a small histidine- and alanine-
rich protein with lower abundance compared with the other HRPs (10), The most important HRP 
regarding diagnosis of falciparum malaria is Pf - HRP-2, a water soluble protein which was recovered 
trom culture supernatants (10, 11) Within falciparum-intected erythrocytes Pf - HRP-2 was identified as a 
surface-exposed protein containing 34% histidine, 37% alanine and 10% aspartic acid (10, 13) As 
Pf - HRP-2 is released by falciparum-infected erythrocytes into plasma it is an potential antigen for 
the specific diagnosis of falciparum malaria (14)

QUIKSTRIP TEST FOR P. FALCIPARUM MALARIA detects the presence of Pf HRP-2 in whole blood 
specimen and is a sensitive and specitic test for the detection of P. falciparum malaria. Since the Pf HRP-2 
persists for upto a fortnight even after successful therapy, a positive test result does not indicate a 
failed therapeutic response (15, 16). ln case the test needs to be used to monitor success of therapy, 
testing is advised only from 15 days atter the completion of therapy, Sensitivity of QUIKSTRIP TEST

FOR P, FALCIPARUM MALARIA in terms of parasitaernia is as follows:
  with 100 parasites / ul of whole blood = 100% sensitivity
  with 50 parasites / ul of whole blood = 70%sensitivity
  with 10 parasites / ul of whole blood = 50%sensitivity


SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION
Fresh anti coagulated whole blood should be used as a test sample and EDTA or, Heparin or Oxalate 
can be used as suitable anticoagulant, The specimen should be collected in a clean gtass or plastic
container, if immediate testing is not possidle then the specimen may be stored at 2 -8 C for upto 72 hours 
before testing Clotted or contaminated blood samples should not be used for performing the test.
Fresh blood from finger prick / punctre may also be used as a test spacimen.

TEST PROCEDURE

 Use applicator   pipette    to the surface of the blood sample tube
 Blot the blood 5-10 ul. on to the sample pad. Just below the arrows  on 
 the dipstick
 Dispense 4 drops  (200 ul.) of clearing buffer into a clean sample cup.
 Place  the dipstick into the sample cup ensuring  that the buffer level is
 below the blood sample
   At the end of 15 minutes read  the test results.


in case finger prick blood is being used, touch the sample applicator pipette to the blood on the 
finger prick and immediately blot the specimen on to the sample pad just below the arrows on the 
dipstick (This delivers approximately 5 ul of the whole blood specimen. Care should be taken that 
the blood sample has not clotted and the transfer to the sample pad is immediate).

TEST EVALUATION
The test results should be read atter 10 - 15 minutes. Further interpretations of the test results should 
not be done atter 15 minutes

NEGATVE for P. talciparum malarin: Only one pink colored band appears on the dipstick

pf1.JPG (1937 bytes)


POSITIVE for P. talciparum malarin:  Two pink colored band appears on the dipstick

pf2.JPG (1939 bytes)

Limitations of the test
1. Since the Pf HRP-2 persists for upto a tortnight even atter suocessful therapy, a positive test result 
    does not indicate tailed therapeutic rasponse,
2. in case the test needs to be used to monitor success of therapy, testing is advised only trom 15 days 
    atter the completion of therapy.
3. As with all diagnostic tests, the resuits must always be correlated with clinical tindings,

PERFORMANCE CHARACTERISTICS
in an independent study, a panel of 167 samples were tested with UL TIMED TEST FOR P. FALCIPARUM
 MALARIA. The results odtained are as tollow:

Sample type  Total no.
Samples testes
Quikstrip  test  for  P.facfiparum
Positive   Negative

Sensitivity
{ %}

Specificity
{%}

 A 74 73 1 98.9% -
 B   8 0 8 - 100
 C 85 1 84 - 98.8


Sensitivity in terms of parasitaemia is as tollows:
with 100 parasites / ul of whole blood = 100% sensitivity
with 50 parasites / ul of whole blood = 70% sensitivity
with 10 parasites / ul of whole blood = 50% sensitivity

in an another indepedent study, 125 patient samples from a P. falciparum endemic area were tested 
with QUIKSTRIP TEST FOR P. FALCIPARUM MALARIA and microscopy (thick and thin smear) 
QWUIKSTRIP TEST FOR P. FALCIPARUM MALARIA was found to be 100% specitic to P. talciparum 
against microscopy. All the 31 samples that tested positive for P. falciparum under microscopy showed 
positive results with QUIKSTRIP TEST FOR P. FALCIPARUM MALARIA The four P. vivax positive 
samples and the 90 malaria negative samples tested negative with microscopy QUIKSTRIP TEST 
FOR P. FALCIPARUM MALARIA showed a 99% correlation with microscopy and a 98% correlation with 
the other immunoohromatographic test

From the adove studies and the results of in hoase data, UL TIMED TEST FOR P. FALCIPARUM 
MALARIA is a highly sensitive and specitic test for the ultimate dlagnosis of talciparum malaria

REFERENCES
1. M.E. jones, MODERN MALARIA Global Medicine Symposinm at the Royal College of Physicians, Edinburgh (1997)
2. Ruiz J-M, Nguyen N, Faugere B, Brouqui P., Bourgeade A, Delmont J.,Epidemiological Particularities of lmported Malaria 
    Attecting Comorians in Marseille' Fllth lnternational Conterenceon Travel Medicine Geneva (1997)
3. Lepelletier D, Guibert Ph., Moreau C., Mariolet M., imported Malaria in Nantes - 13 Years of Surveillance (1984/98) Fifth 
    lnternational Conterence on Travel Medicine, Geneva (1997)
4. Howard, R.J., et al, 1986 : Secretion of a Malarial Histidine-rich Protein
    (Pf HRP-2) from Plasmodium falciparum-infected Erythrocytes. J. Cell Biol.., 103, 1269-1277.
5. Rock, E.P., et al, 1987 : Comparative Analysis of the Plasmodium falciparum Histidine-Rich Proteins 
    HRP-I, HRP-II, and HRP-III in Malaria Parasities of Diverse Origin. Parasitol., 95, 209-227.
6. Parra, M.E., et al, 1991 : Identification of Plasmodium falciparum Histidine-Rich Protein-2 
    in the Plasma of Humans with Malaria. J. Clin. Microbiol., 29, 1629-1634
7. Rodriguez-Del valle, M., et al 1991 : Detection of Antigens and Antibodies in the Urine of 
    Humans with Plasmodium falciparum Malaria. J. Clin. Microbiol, 29, 1236-1242.
8. Data on file, Orchid Biomedical Systems.
9. Shiff C.J., Premji Z., Minjas J.N., The rapid manual ParaSight-F test. A new diagnostic tool for 
    Plasmodium falciparum infection, Trans R Sec Trop Med Hyg 1993 Nov-Dec 87 : 6 646-8
10. Beadle C., Long G.W., McElroy P.D., Maret S.M., Oloo A.J., Hoffman S.L., “Diagnostic of 
    malaria by detection of Plasmodium falciparum HRP-2 antigen with a rapid dipstick antigen-capture assay”, 
    Lancet 1994 Mar 5 343:8897 564-8



wpe5.jpg (2190 bytes)

Email : info@thailabonline.com

Phone : (02) 803-7310-11   Fax. : (02) 803-6704

 

  
About Us | Add URL I Privacy Policy | Member Register | Health Shop | Contact Us | Health Board | Advertising
Disease / Condition | Head Line News | Healthcare | Diagnostic | Alternative Medicine | Aromatherapy |
Health Game Zone


1999-2009 Thailabonline.com. All rights reserved. 
เลขทะเบียนพาณิชย์อิเล็กทรอนิกส์  e-Commerce Registration Number  7100803000130
By using this information service,    you accept the terms of our Visitor Agreement. Please read it. 
The material on Thailabonline.com and iHealthsite.net are for informational purposes only and is not 
a substitute for medical advice or treatment for any medical conditions.   You should promptly seek 
professional medical care if you have any concern about your health, and you should always consult 
your physician before starting a fitness regimen.
”Thailabonline.com” and “ihealthsite.net” and ”AromaEssence” and ”MedHealthMart” are trademarks of Crystal Diagnostics Co.,Ltd.